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體積排阻色譜柱(SEC)   

尺寸排阻色譜(Size Exclusion Chromatography,SEC),是基于體積排阻的分離機理,按尺寸分離天然及合成聚合物、生物聚合物、蛋白質或納米顆粒的色譜技術。市場上主要品牌有TSK、Shodex等,CNW體積排阻色譜柱在質量上同樣優異。

如右圖所示,SEC柱的填料為多孔高純硅膠或聚合物。完全不能進入填料凝膠孔徑內的大分子,只能在填料顆粒間空隙中通過,最早流出(即全部排阻);能自由出入填料孔內小分子,最后流出(即全部滲透);其它分子在填料孔內停留時間不同而按分子的大小順序分離。

因此,這些小分子在SEC柱中的保留時間較長,而大于SEC孔徑的分子,不能進入凝膠顆粒的孔內,只能從凝膠顆粒的間隙流出SEC柱,因此這些大分子在 GPC柱上的保留時間較短。

適用的溶質分子量范圍為即為每根色譜柱的線性范圍可以查詢色譜柱對應分子量校正曲線得到。而每根SEC柱都有其分子量排阻限 (Exclusion Limit)。分子量大到不能進入任何顆粒內孔中的分子將會被死體積的溶液洗脫。不能進入顆粒內孔的最小分子尺寸定義為該SEC柱的排阻限。

尺寸排阻色譜可以分為:

凝膠滲透色譜(GPC):固定相為疏水凝膠,流動相為有機溶劑,分離油溶性高聚物。

凝膠過濾色譜(GFC):固定相為親水凝膠,流動相為水溶液,分離生物高分子如蛋白質、核酸、酶及多糖。


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